Michael Peres miluje fotografování drobných detailů našeho přirozeného světa. Profesor biomedicínské fotografické komunikace na Rochester Institute of Technology, Peres, se specializuje na zachycení těchto složitých detailů fotografováním pomocí mikroskopu. Zde vysvětluje, jak to dělá.
O focení malých věcí jsem se začal zajímat před více než 40 lety, když jsem na vysoké škole studoval předlékařskou školu. Byl jsem vystaven tomuto fascinujícímu a neviditelnému světu, když jsem se učil, jak ohraničit svalovou tkáň od pojivové tkáně pomocí světelného mikroskopu. Byl jsem vtažen do každého nového předmětu, který jsem měl studovat, a stále mě udivuje, jak jsou věci organizovány. Rád fotím sněhové vločky, květiny a další přírodní objekty. Svou práci jsem začal sdílet na Instagramu v březnu 2014 a byl jsem fascinován celosvětovými sledujícími, které moje obrázky přitahují.
Nalezení objektu pro mikroskopickou fotografii
Nalezení dobrého předmětu začíná tím, že zůstanete zvědaví na svět. Myslím, že je opravdu důležité mít otevřenou mysl ohledně potenciálních vzorků. Onehdy se na procházce s mým psem vrátil domů naložený otřepy. Poté, co jsem jich odstranil co nejvíce, rozhodl jsem se jeden prozkoumat pod mikroskopem. Byl to jen plevel, ale pod mikroskopem se stal elegantním a komplexním.
Umístění malých objektů a manipulace s nimi je velkou součástí úspěchu procesu. Poškozené vzorky nebo vzorky s artefakty budou mít jinou vizuální prezentaci než vynikající vzorky a je důležité, aby se poškození nestalo středem fotografie. Nalezení vzorku bez vad je první prioritou pro typ obrázků, které chci udělat. To neznamená, že předměty mé fotografie jsou dokonalé – nejsou.
Když připravuji vzorek, přemýšlím o dvou různých věcech fotografovat – pitva a izolace, která z nich má přednost, závisí na předmětu a jeho zvětšení. Při fotografování květin obvykle používám pitevní nůžky k odstranění okvětních lístků, abych zlepšil viditelnost jejích konstrukčních prvků. Když fotím vodní organismy, snažím se je izolovat v kapce vody pod krycím sklem. Méně je v tomto případě vždy více. Každý předmět přináší jedinečné problémy a vyžaduje různé metody, aby byl vzorek dostatečně malý, plochý nebo tenký pro fotografování.
Kupuji také připravená biologická preparáty, jako jsou řezy rostlinami nebo živočišnou tkání – je velmi obtížné připravit tyto typy preparátů bez přesného vybavení. Wards Natural Science a Carolina Biological Supply Company prodávají tisíce předmětů, které jsou připraveny k mikroskopickému vyšetření.
Zařízení potřebné k vytvoření mikroskopického snímku
Při fotografování mikroskopických snímků jsou mým zásadním vybavením mikroskopy, světlo z optických vláken, tělo digitální zrcadlovky, makro objektiv, prodlužovací trubice, měchy a stativ. Když fotím sněhové vločky, květiny nebo jiné objekty v přírodě, jsem často ve své garáži a mám připravenou zásobu čistých mikroskopických preparátů a kus černé sametové látky pro použití jako pozadí. Mám také mnoho jehel, malých štětců a tyčinek s bavlněnou špičkou, které používám k přemísťování vzorků a čištění oblasti kolem nich.
K fotografování obvykle používám složený světelný mikroskop. Světelné mikroskopy jsou docela běžné a snadno se shánějí. Mohou být drahé nebo relativně levné, studentský mikroskop může stát pouhých 250 USD, zatímco špičkový výzkumný mikroskop může stát 200 000 USD. Poměrně dobrý mikroskop používaný pro výzkum nižší třídy lze nalézt za 5000 $.
Mikroskopy zvětšují objekty pomocí dvou čoček. První stupeň zvětšení vytváří čočka objektivu a druhý stupeň zvětšení je okulár. Objektiv má ohniskovou vzdálenost stejně jako tradiční fotografické čočky, které se používají na fotoaparátech DSLR. Pracovní vzdálenosti jsou pro tento typ fotografie velmi malé – typický rozsah zvětšení objektivu pro světelný mikroskop může zahrnovat 2x, 4x, 10x, 20x, 40, 60x nebo 100x. Vybírám si čočku na mikroskopu na základě požadavků na zvětšení vzorku. Zvětšení ovlivňuje hloubku ostrosti obrazu, takže velký silný vzorek (0,5 cm) těží z malého zvětšení, zatímco velmi ploché objekty potřebují větší zvětšení.
Při použití světelného mikroskopu je možné pořizovat snímky pomocí chytrého telefonu nebo fotoaparátu s pevným objektivem a je to skvělý výchozí bod. U těchto kamer by měla být čočka umístěna v očním bodu mikroskopu, který lze lokalizovat přidržením kusu papíru přibližně 1 cm od okuláru mikroskopu. Na papíře bude viditelný velmi malý světelný bod, to je bod oka a kam by měla čočka nasměrovat. K držení fotoaparátu na místě může pomoci malý stativ. Gafferova páska je často mým nejlepším přítelem technického fotografa, protože mi během focení umožňuje zabezpečit telefon o další prvky systému.
I když používání chytrého telefonu nebo fotoaparátu s pevným objektivem funguje, rád používám Nikon D300s nebo D800 s odstraněným objektivem a tělem zavěšeným přes okulár mikroskopu pomocí vertikálního kopírovacího stojanu nebo stativu. Také používám prodlužovací trubice nebo měchy na mém fotoaparátu ke správě okolního světla – což může vytvářet záblesky a nižší kontrast. U DSLR musíte zarovnat snímač fotoaparátu přes malý světelný bod z bodu oka. Abych vytvořil mikroskopický obraz, zarovnám snímač svého fotoaparátu nad okulárem ve vzdálenosti, kde je kruh osvětlení vytvářený mikroskopem dostatečně velký, aby zakryl snímač, aniž by byl kruh vidět. Zkontrolujte LCD displej fotoaparátu a ověřte, že světelný bod zakryl snímač. Při nastavování však buďte opatrní:je velmi důležité dbát na vzdálenost mezi okulárem a nechráněným snímačem.
Osvětlení mikroskopického předmětu
Používám primárně vestavěné světlo mikroskopu a doplňuji jej osvětlením z optických vláken. Když se podívám na vzorek poprvé, představím si, jak chci, aby obrázek vypadal, a pracuji na tom, abych se tam dostal. Provádím mnoho drobných úprav polohy světla, což znamená velký rozdíl ve výsledcích. Některé z objektů, které fotím, mohou mít velikost jeden nebo dva milimetry nebo menší. O tom, kolik světla je potřeba nebo jaký je správný úhel světla, se rozhoduji před focením. Moje strategie je z velké části založena na tom, jak světlo pracuje se samotným vzorkem. Tři styly osvětlení, které používám nejčastěji, jsou Kohler, Darkfield a Polarized, čtěte dále pro více informací o každém z nich.
Jak používám osvětlení Kohler při fotografování mikroskopických objektů
Když fotím připravený „tenký řez“, snažím se vytvořit neutrální a jednotné zadní osvětlení zvané Kohler illumination. Tento styl osvětlení umožňuje mikroskopu maximalizovat kontrast a rozlišení v obrazu a produkci rovnoměrného a rovnoměrného osvětlení za vzorkem. Pokračuji v jeho používání, protože vytváří portrétní úpravy věcí, které fotím.
Jak používám tmavé pole při fotografování mikroskopických objektů
Použiji také tmavé pole, které objekt rozzáří na černém pozadí , vytvářející vzhled astronomického typu. Tmavé pole přichází zezadu za průhledným objektem a prosvítá vzorkem v šikmých úhlech. Tento styl osvětlení vytváří velmi dramatický vzhled, nevýhodou je, že při použití tmavého pole bude osvětleno vše, včetně věcí, které nechcete mít rozsvícené – jako jsou špína, škrábance nebo vzduchové bubliny.
Jak používám polarizované osvětlení při fotografování mikroskopických objektů
Polarizované světlo používám, když fotím vzorky, které vykazují dvojlom technický termín, který popisuje, jak vzorek může, ale nemusí „vykazovat“ barvy podobné duze, když je umístěn do mikroskopu s polarizovaným světlem. Vzorky, které obsahují chlupy, vlákna, chemikálie, minerály, některá hmyzí křídla a mnoho syntetických předmětů, budou při zkoumání pomocí polarizovaného světla vypadat, jako by byly vyrobeny z duhy. Polarizované světlo se používá k odhalení vnitřních informací v těchto vzorcích, které by jinak nemusely být viditelné.
Zaostřování při fotografování mikroskopických fotografií
Pro zaostření zvětšeného obrazu pomocí své digitální zrcadlovky sejmem objektiv fotoaparátu a promítám obraz přímo do těla fotoaparátu DSLR. Ovládací prvky zaostření mikroskopu se pak používají k zaostření obrazu v hledáčku fotoaparátu. Vytvořit ostrý obraz může být náročné. Hledáček DSLR nezachytí stejné množství jemných detailů, jaké dokáže vytvořit mikroskop, takže věci často vypadají v hledáčku trochu drsněji, než se nakonec dívají do souborů RAW. Chce to trochu cviku, abyste byli schopni předvídat, jak bude obraz vypadat, jakmile bude zaznamenán.
Je také možné zaostřit pomocí živého náhledu. Ve slabě osvětlené místnosti to může být velmi užitečné pro pozorování kritické definice obrazu ve vzorku. Pokud používáte chytrý telefon, který byl pečlivě umístěn nad okulárem, stále budete chtít zaostřit obraz zobrazený na displeji telefonu manipulací s knoflíkem ostření mikroskopu.
Zpracování vašich mikroskopických snímků
Jednou z největších výzev v tomto typu práce je vytváření kontrastu a strukturální vykreslení vnitřních částí a já se snažím dělat těžkou práci při focení. Když fotím, pracuji pomalu, abych se posouval k zajímavému výsledku pomocí objektivů a světla.
Jsem velmi opatrný ohledně příliš velkého zpracování obrazu. V postprocessingu mě nejvíce zajímá správa tónů, nastavení bílých nebo černých bodů a odstranění nepodstatných nečistot. Nafotím RAW, otevřu soubor RAW ve Photoshopu a poté předzpracuji strukturální detaily, které jsou v souboru přítomné, ale často nejsou příliš viditelné. V této fázi také provádím menší množství vyjasnění nebo doostření. Po provedení drobných změn tónů ve Photoshopu soubor zaostřím pomocí vysokopásmového filtru.
Myslím, že je důležité, aby obrázky nebyly zcela bezchybné. V životě není nic dokonalé a myslím, že pokud jsou obrázky příliš dokonalé, mohou se zdát vytvořené počítačem. Mým cílem této práce je vytvářet vědecké fotografie, které fungují v nevědeckém prostředí a umožňují lidem dozvědět se něco nového o světě, ve kterém žijí. Moje obrázky zobrazují skutečné věci a život má také vady a oblasti, které jsou rozostřené.